FluorCam uzavřený GFP/Chl. fluorescenční zobrazovací systém

FluorCamUzavřený GFP/Chl. fluorescenční zobrazovací systém může sloužit řadě molekulárních a buněčných výzkumů aplikovaných na zelené fluorescenční proteiny. Na uzavřeném fluorescenčním zobrazovacím systému je nainstalováno kompletně softwarově řízené a elektricky poháněné kolo filtrů a řada filtrů pro detekci a zobrazení GFP, EGFP, wtGFP, YFP, BFP nebo jiných pásmových fluorescenčních proteinů a fluorescentů.

Zavřený fluorescenční zobrazovací systém GFP/Chl. FluorCam může být také použit k detekci dynamických změn a prostorového rozložení fluorescence chlorofylu emitované rostlinami, k měření procesu Kautskyho efektu, fluorescenčního potlačení a dalších okamžitých fluorescenčních procesů (transientních) a k poskytování 2D fluorescenčních obrazů. Speciálně navržená konfigurace hardwaru umožňuje automatickou přeměnu systému na fluorescenční snímky proteinů, fluorescenčních snímků nebo fluorescenčních snímků chlorofylu. Systém je vysoce integrovaný a může provádět tmavou adaptaci vzorku.

Oblasti použití:

Detekce fluorescenčních proteinů a fluorescentů

• Technologie transferu genů a biosensorů

• Výzkum geneticky modifikovaných rostlin

• Testování rezistence různých genotypů

Výzkum interakcí rostlin a mikroorganismů

Výzkum interakcí rostlin a živočichů

· Fotosyntetické vlastnosti rostlin a screening metabolických poruch

Detekce biologického a nebiologického nátlaku

Výzkum odolnosti vůči stresu nebo citlivosti rostlin

• Výzkum nerovnoměrnosti vzduchu

Výzkum metabolického chaosu

• Hodnocení výkonu a výnosu

Funkce:

· Snadné ovládání, výškově nastavitelný vzorek měření, integrovaná speciální tmavá adaptační krabice, usnadňující zpracování tmavé adaptace testované rostliny, provoz atd.

CCD s vysokým rozlišením až 1392 x 1040 pixelů pro rychlé a přesné zachycení fluorescence chlorofylu a GFP

• Můžete provádět automatické opakované měření zobrazení, můžete nastavit experimentální program (protokoly) pro automatické cyklické měření zobrazení, data měření zobrazení jsou automaticky uložena do počítače podle časového datu (s časovým razítkem)

S různými obecnými experimentálními postupy (protokoly) jako je Kautskyho indukční efekt, fluorescenční analýza zhasení, měření více než 50 analytických parametrů

Volitelný barevný zobrazovací modul TetraCam s maximální zobrazovací plochou 20 x 25 cm pro měření tvaru listů nebo rostlin

Typické vzorky:

• Listy, stonky, semena, kořeny, celá rostlina.

• Zraněné tkáně, malé sadnice v nádobí

• Ovoce a květiny

• Modré bakterie, zelené řasy, bakterie

• Geneticky modifikovaná zvířata

Technické parametry:

• Parametry měření: Fo, Fo’, Fs, Fm, Fm’, Fp, FtDn, FtLn, Fv, Fv'/ Fm'，Fv/ Fm ,Fv',Ft,ΦPSII,NPQ_Dn, NPQ_Ln, Qp_Dn, Qp_Ln, qN, qP，QY, QY_Ln,Rfd, ETR Více než 50 fluorescenčních parametrů chlorofylu, každý z nich může zobrazit 2D fluorescenční barevný obraz

Kompletní automatický měřicí program (protokol), který umožňuje volné úpravy automatického měřicího programu

a) Fv/Fm: měřicí parametry zahrnují Fo, Fm, Fv, QY atd.

b) Kautskyho indukovaný efekt: fluorescenční parametry Fo, Fp, Fv, Ft_Lss, QY, Rfd atd.

c) Analýza fluorescence: Fo, Fm, Fp, Fs, Fv, QY, ΦII, NPQ, Qp, Rfd, qL atd. Více než 50 parametrů

d) Křivka odpovědi na světlo LC: Fo, Fm, QY, QY_Ln, ETR a další fluorescenční parametry

e) Absorpce PAR s NDVI (volitelné)

f) Reoxidační dynamika (volitelné)

g) Měření statického fluorescenčního zobrazení jako GFP

h) Rychlá fluorescenční dynamická analýza OJIP (volitelná): Mo (počáteční sklon křivky OJIP), pevná plocha OJIP, Sm (měření energie potřebné k vypnutí všech center světelné reakce), QY, PI atd. 26 parametrů

Vysoké rozlišení TOMI-2 CCD senzor

a) Postupní skenování CCD

b) Maximální rozlišení: 1360 x 1024 pixelů

c) Časové rozlišení: až 20 snímků za sekundu při maximálním rozlišení

Rozlišení převodu A/D: 16 bitů (65 536 stupňů šedé barvy)

e) Velikost obrazu: 6,45 µm x 6,45 µm

f) provozní režim: 1) režim dynamického videa pro měření fluorescenčních parametrů chlorofylu; 2) režim snímku pro měření fluorescenčních proteinů a fluorescenčních barviv, jako je GFP

g) Režim komunikace: Gigabit Ethernet

• Světelná deska: 4 velké LED panely s vysokou intenzitou, každý panel se skládá z pole 8 x 9 LED, efektivní plocha panelu je stejná jako zobrazovací plocha 13 x 13 cm

• Měření světla: standardní červené světlo 617 nm, volitelné další pásmo, nastavitelná doba trvání 10 µs – 100 µs

• 2 červené světlo (617nm) + 2 modré světlo (470nm), Actinic1 maximální intenzita světla 300 µmol (fotony) / m².s, Actinic2 maximální intenzita světla 2000 µmol (fotony) / m².s; Maximální fotochemické světlo může být upgradováno na 3000 µmol (fotony) / m².s

• Nasycený blesk: maximální intenzita světla 4000 µmol (fotony) / m².s, upgradovatelná na 6000 µmol (fotony) / m².s

• Obrazovací plocha: 13 x 13 cm, umožňuje zobrazení listů rostlin, rostlinných tkání, řas, mechů, zemních krytů, celých rostlin nebo více rostlin, 96 dírek, 384 dírek atd.

• Měřicí modul GFP: 7-bitové filtrní kolo s speciálním filtrem pro měření GFP (zeleného fluorescentního proteinu)

• Měřicí modul pro absorpci PAR (volitelné): Far Red Light 740nm (FAR), 660nm dvoubarevné LED světelné panely a speciální filtry pro měření absorpce PAR a NDVI

• QA v oxidační dynamické zobrazovací analýze (volitelné): může být provedeno měření fluorescenční dynamické analýzy STF s jednooběhovým bleskem (STF) až 120 000 µmol (fotony) / m².s v 100 µs

• Modul rychlé fluorescenční dynamiky OJIP (volitelné): časové rozlišení až 1 µs, může být měřena a analyzována křivka OJIP s více než dvaceti souvisejícími parametry včetně: Fo, Fj, Fi, P nebo Fm, Vj, Vi, Mo, Area, Fix Area, Sm, Ss, N Phi--_Po, Psi_o, Phi_Eo, Phi_Do, Phi_pav, ABS/RC (kvantový tok absorbujícího světla v jednotlivém reaktivním centru), TRo/RC (počáteční kvantový tok zachytávání světla v jednotlivém reaktivním centru), ETo/RC (počáteční kvantový tok světla přenášejícího elektrony v jednotlivém reaktivním centru), DIo/RC (rozptýlení energie v jednotlivém reaktivním centru), ABS/CS (kvantový tok absorbujícího světla v jednotlivém průřezu vzorku), TRo/CSo, RC/CSx (hustota reaktivního centra), PIABS (index „výkonu“ nebo přežití založený na kvantovém toku absorbujícího světla), PIcs (index „výkonu“ nebo přežití založený na průřezu)

• UV LED světelný zdroj (volitelné): 365nm nebo 385nm, 1) měření multibarevné fluorescence (podrobnosti viz FluorCam multispektrální fluorescenční zobrazovací systém); 2) Měření wtGFP (divoký typ zeleného fluorescenčního proteinu), DAPI (4',6-dioxyl-2-phenylpiper, fluorescenční barviva)

• Modrá LED světelná deska (volitelná): 470 nm, 1) měření EGFP (posilněný zelený fluorescenční protein); 2) pro výzkum funkce pory

• Zelená LED světelná deska (volitelná): 530 nm, měření YFP (žlutý fluorescenční protein)

* Měření fluorescenčních bílkovin nebo fluorescenčních barviv jako wtGFP, DAPI, EGFP, YFP vyžaduje také příslušný filtr

• FluorCam fluorescenční zobrazovací analytický software: funkční nabídky Live (test v reálném prostředí), Protocols (nastavení výběru experimentálního programu), Pre-processing (předzpracování obrazu), Result (výsledek zobrazovací analýzy) a další

• Zákaznicky přizpůsobené protokoly: lze nastavit čas (např. doba měření světla, doba fotochemického světla, doba měření atd.), intenzitu světla (např. intenzita fotochemického světla různé kvality světla, intenzita nasyceného záblesku, modulace měření světla atd.), s speciálním jazykem a skriptem experimentálního programu, uživatelé mohou také svobodně vytvářet nové experimentální programy pomocí šablony průvodce v nabídce Protokol

• Funkce automatické analýzy měření: nastavení protokolu pro automatické měření cyklického zobrazení bez hlídky, počet opakování a časové intervaly na míru zákazníka, data měření zobrazení jsou automaticky uložena do počítače podle časového datu (s časovým razítkem)

  Snímkový režim: Snapshotový režim umožňuje volné nastavení intenzity světla, času vypínání a citlivosti pro jasně vynikající fluorescenční a okamžitou fluorescenci rostlinných vzorků

• 

• Předzpracování zobrazení: Programový software může automaticky rozpoznat více vzorků rostlin nebo více oblastí nebo ručně vybrat oblast zájmu (ROI). Obraz ručního výběru může být čtvercový, kruhový, libovolný polygon nebo sektor. Software umožňuje automatické měření a analýzu fluorescenčních dynamických křivek a odpovídajících parametrů pro každý vzorek a vybranou oblast, neomezený počet vzorků nebo oblastí (> 1000)

• Režim analýzy dat: s režimem "přepočítání signálu" (aritmetický průměr) a režimem "přepočítání signálu", vyberte režim "přepočítání signálu" v případě vysokého poměru signálu a hluku, vyberte režim "přepočítání signálu" v případě nízkého poměru signálu a hluku, abyste filtrovali chyby způsobené hlukem

• Výstupní výsledky: fluorescenční dynamický diagram s vysokým časovým rozlišením, video s fluorescenční dynamickou změnou, soubor Excel s fluorescenčními parametry, histogram, grafický diagram s různými parametry, seznam fluorescenčních parametrů s různými ROI atd.

• Šířka pásma detektoru CCD: 400-1000 nm

Systém osvětlení: statický nebo dynamický (sinusový)

Spektrální odpověď: nejvyšší kvantová účinnost (70 %) při 540 nm a snížení o 50 % při 400 nm a 650 nm

Hluk při čtení: méně než 12eRMS, typicky 10e

Plná kapacita: více než 70 000 e (unbinned)

Bios: Firmware lze aktualizovat

• Způsob komunikace: Gigabit Ethernet

Rozměry: 471 mm (Š) × 473 mm (D) × 512 mm (H)

Hmotnost: přibližně 40 kg

Přístup: přibližně 1100 W

Napětí: 90-240 V

Typické aplikace:

Šanghajský institut pro vědy o životě použil FluorCam k měření zobrazení GFP získaného na snímku, který ukazuje, že rostliny vyjadřující jasnou barvu jsou rostliny, které vyjadřují GFP.

Kontrakce knoflíkových korálů - rozšíření v různých fázích (T1 = 0, T2 = 30, T3 = 60) NDVI a GFP zobrazovací analýza (Miguel, 2014)

Původ: Evropa